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内含福利 || 那些年,血清为实验猿背的“锅”.......

时间:2019-10-30 浏览次数:12

细胞培养可以说是整个生物技术产业的发展的核心,培养基的质量则是影响细胞培养的关键因素。在培养基的各种成分中,血清是细胞培养过程中外源添加的成分不确定的物质,血清的质量直接影响到细胞培养的效果,甚至对整个实验的成败起着关键性的作用。

 

所以,选用优质血清能够使我们的实验少走弯路,“赢在起跑线上”。然而,Gibco曾就血清质量做过一次调查,结果表明:使用者对血清不正确的储存与使用方式常常导致了血清质量下降,实验效果不理想。

 

 

加拿大28龙虎豹预测那么问题来了:血清在储存与使用过程中有哪些注意事项?如何才能保证采购的优质血清在储存过程中不产生质量损失呢?

 

下面我整理了一些Q&A供大家参考:

 

Q:保存血清推荐的方法?

A:我们建议血清应保存在-5 ℃至-20 ℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

 

Q加拿大28龙虎豹预测:如何解冻血清才不会使产品质量受损?

A:我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8 ℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀

 

Q:血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?

A:血清中沉淀物的出现有许多种原因,但比较普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白 (形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400 g 稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

 

Q:为什么要热灭活血清?

A:加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES 细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。

 

Q:有必要做热灭活吗?

A:实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是 “小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!

 

Q:为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?

A:胎牛血清储存在2-8 ℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20 ℃储存胎牛血清,避免反复冻融。

 

Q:如何避免沉淀物的产生?

A:我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:解冻血清时请按照所建议的逐步解冻法 (-20 ℃至4 ℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20 ℃至37 ℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

 

关于血清的储存与使用,若您还有其他疑问,欢迎在评论区留言~

 

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